Oligonükleotit kısa, tek sarmallı nükleikasit fragmanlarına bölümlerine verilen addır, laboratuvar ortamında sentetik olarak kimyasal sentez yönetmiyle oluşturulan-üretilen kısa DNA ve RNA zincirleridir.
Oligonükleotitler, biyokimya, biyoloji, moleküler tanımlama-teşhis, moleküler biyoloji genom çalışmaları gibi DNA ile ilgili yapılan pek çok çalışmada farklı amaçlar için kullanılır.